科研实验外包细胞生物学中常用的实验技术

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发表时间:2023-09-06 14:40


一、细胞培养常用具体方法
1、神经元原代培养(primayculture)又称初代培育,即直接从机体取下神经元、组织、或器官、这样才能在体外维持与生长。原代细胞最大的特点就是神经元或组织刚离开机体,他们的生物状况尚未发生很大变化,在很大程度上可反映他们在体内的状况,表现出主要来源组织或神经元的特性,所以用于药物实验尤其是治疗药物对神经元活动、结构、、有无毒性或杀伤功用等研究是极好工具。常用的原代培养方法有组织快培养法及消化培养法。前者具体方法简单,神经元也较易生长,尤其是培育心肌有时能观察到心肌组织块的搏动。神经元从组织块外长并放满培养皿或培养瓶后可进行传代。2、细胞传代培养当细胞的生长至单层汇合时,便需要进行分离培养否则容易因无繁殖空间、营养可再生性而影响生长,甚至整片神经元脱离基质漂浮起来直至死亡。为此当神经元达到一定的密度时传代或重新培育,目的就是为了借此繁殖更多的神经元,另一方面是预防细胞受损死亡。
二、器官栽培方法
器官培育(organculture)是指用独特的装置使器官、器官原基或它们的其中一部分在体外存活,幷保持其原有的结构功能。器官培育可模拟身体中的三维结构,用于查看组织间相互反应、组织及细胞的分化以及外界因子涉及治疗药物对领导细胞的作用。
器官栽培方法很多,经典具体方法即表玻皿器官培养法;一种最有效的方法是不锈钢金属网格法及wolff培养法和扩散盒培养法,实验者可根据情况选择采用。
三、蔓延自显影液术测定
蔓延自显影液术(autoradiography)是利用放射性同位素电离辐射对热核反应橡胶枕头的感光功用,显示标本或样品中放射物地理分布、定量以及定位的具体方法。放射性同位素能在紧凑接触的感光橡胶枕头中记录下它出现的位置及度,准确显示出特征与功能产品的定位关系。现已可将蔓延自显影液术与电镜以及生物分子结合起来。不但可以研究有害物质在组织和细胞内地理分布,同时还能揭示核酸合成及其损伤等改变,目前早已在生命科学各领域得到了广泛的应用。

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